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20.（10分）PVC（聚氯乙烯）为无定形结构的白色粉末，是世界上产量第三大的合成聚合物塑料·在自然界中难以降解危害人体健康。研究发现草地贪夜蛾幼虫可取食PVC薄膜并利用其能量短暂存活，这与昆虫肠道中的细菌有关。研究团队对草地贪夜蛾幼虫肠道内的微生物进行了筛选及分离培养，过程如图所示。回答下列问题：解剂取肠道内容物PVC饲养12天富集培养选择培养I号培养基无菌水Ⅱ号培养基（1）实验操作中用PVC饲养草地贪夜蛾幼虫12天，目的是；富集培养所用的培养基为（2）I号培养基与富集培养所用的培养基相比，特点是；选择培养后用无菌水进行梯度稀释是为了（3）为统计选择培养后菌体的数量，可采用的接种方法是；接种时要注意无菌操作如（4）实验中初步估测培养瓶中细菌细胞数为3×10°个/mL，若在每个板上涂布0.1mL稀释后的菌液，且保证每个板上长出的菌落数不超过300个，则至少应将培养瓶中的菌液稀释倍。接种后的板在适宜条件下培养，最后统计的菌落数量往往比实际菌体数量少，原因是。细菌降解PVC能力的大小可根据进行判断。21.（12分）科学家从某细菌中提取抗病基因并转人番茄，来培育转基因抗病番茄植株，过程如图所示。含目的基因的外源DNA上的箭头表示相关限制酶的切割位点。回答下列问题：XhoIMunI17S—3'注：限制酶识别序列及切割位点XhoIMunI:5'-CAATTG-3'启动子Mun1①含抗病基因的农杆菌-SalIXhoI:5'-CTCGAG-3Ti重组质粒标记基因-DNA终止子EcoRI:5'-GAATTC-3转基因④番茄Ti质粒番茄植株愈伤组织SalI:5'-GTCGAC-3'EcoRI标记基因一(1)以含目的基因（抗病基因）的外源DNA为模板进行PCR获取抗病基因时，除加人引物、模板、缓冲液、Mg+外，还需加人等（答两点）；缓冲液中Mg的作用是。应设计2种引|物，原因是(2)已知抗病蛋白基因转录得到的mRNA前三个碱基为起始密码子AUG。研究发现在紧的邻起始密码子前加人5'-GCCACC-3'序列，会显著提高基因的表达效率。利用PCR技术获取抗病蛋白基因时，为保证抗病基因能正确插人Ti质粒且高效表达，需在上游的引引物的5'端增加碱基序列5'-3'（写出12个碱基），据图可知，应选用处理Ti质粒。(3)图中步骤③是将含重组Ti质粒的农杆菌导人番茄细胞，实现该目的的基础是农杆菌侵体染植物细胞后，能将，步骤④是过程。(4)欲鉴定经过步骤④获得的转基因番茄植株是否具有抗病性，进行个体检测和鉴定的方法是：发09B【高二5月冲刺考·生物学第6页（共6页）】25-X-7B